RT info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
T1 Estenosis aórtica calcificada y proteínas de la superfamilia del colágeno
A1 Pérez Riesgo, Enrique
A2 Universidad de Valladolid. Instituto de Biología y Genética Molecular (IBGM)
K1 Estenosis aórtica
AB El hecho de que el análisis del genoma completo de células AVIC mostrara una mayor expresión del gen col13a1 en células AVIC estenóticas respecto de las células AVIC controles, nos llevó a estudiar el efecto de la sobreexpresión de colágeno XIII en células AVIC Control. Los objetivos concretos fueron:1) Puesta a punto de la sobreexpresión de colágeno XIII en AVIC mediante dos técnicas de transfección transitoria.2) Efecto de la sobreexpresión de colágeno XIII en la inducción de genes pro-inflamatorios en AVIC. Tanto el método de Lipofectamina como el de Turbofectin se pueden usar para la sobreexpresión de colágeno XIII en células adherentes AVIC.Con ambos métodos se observa una baja eficiencia de transfección, aunque es mayor en el método de Lipofectamina que en el de Turbofectin.Las proporciones óptimas de DNA:Reactivo de transfección en AVIC son 4:2 (μg:μL) para el método de Lipofectamina y 3:3 (μg:μL) para el método de Turbofectin.El colágeno XIII sobreexpresado en células AVIC se secreta y acumula en el medio extracelular. El plásmido pc3.1-ColXIII-EGFP no es adecuado para estudiar el efecto de la sobreexpresión de colágeno XIII a nivel de inducción de proteínas proinflamatorias dado el efecto artefactual de la proteína EGFP. La sobreexpresión de colágeno XIII en células AVIC induce de modo estadísticamente significativo la expresión de ICAM-1 y COX2, lo que está de acuerdo con un fenotipo pro-inflamatorio que subyace en los estadios iniciales de la estenosis aórtica.En el dominio experimental ensayado, la mayor inducción observada, tanto de ICAM-1 como de COX2, corresponde a la combinación del plásmido pc3.1- ColXIII con el reactivo Lipofectamina a las 48horas
YR 2015
FD 2015
LK http://uvadoc.uva.es/handle/10324/14325
UL http://uvadoc.uva.es/handle/10324/14325
LA spa
DS UVaDOC
RD 26-abr-2024