RT info:eu-repo/semantics/bachelorThesis T1 Onda de calcio intercelular en epitelio pigmentario de la retina humano: mediciones directas de calcio reticular A1 González Zamora, Jorge A2 Universidad de Valladolid. Facultad de Medicina K1 Onda de calcio intercelular K1 Epitelio pigmentario de la retina AB Hasta el más simple órgano de la visión se compone de al menos dos tipos celulares: los fotoreceptores y las células pigmentadas, demostrando la vital importancia de su interacción. En vertebrados, el epitelio pigmentario de la retina (EPR) se localiza entre los segmentos externos de los fotoreceptores y los capilares de la coroides y desde esta posición estratégica realiza una gran variedad de funciones: absorbe luz, actúa de barrera hemato-retiniana, secreta numerosos factores, recicla el foto- pigmento de los fotoreceptores y fagocita sus segmentos externos entre otras muchas funciones. El Ca2+ es un señalizador intracelular ubicuo responsable del control de un extraordinario número de procesos celulares y el EPR no es una excepción, en él se han descrito multitud de procesos en los que está implicado una señal de calcio, incluyendo ondas de Ca2+ intercelulares (OCI) que se extienden radialmente desde el foco en que se originan. En EPR y otros tipos celulares que presentan OCI se hace referencia al incremento de la concentración de Ca2+ citoplasmático [Ca2+]cit desde los depósitos intracelulares, cuyo principal exponente es el retículo endoplasmático (RE), sin embargo mediciones directas de la concentración de Ca2+ reticular [Ca2+]RE no habían sido realizadas debido a la dificultad para medir precisamente la [Ca2+]RE . En el presente trabajo usamos el nuevo sensor de calcio recientemente descrito por nuestro grupo, GAP3, en la línea celular de EPR humano ARPE-19 para profundizar en los mecanismos y realizar las primeras mediciones de la [Ca2+]RE durante la OCI. De los resultados se confirma la existencia de una OCI desencadenada por estímulo mecánico en la línea ARPE-19, de extensión limitada a unas 7 capas celulares. El ATP difunde extracelularmente, a partir de la célula estimulada, y es la principal molécula implicada en la propagación de la OCI descartándose una contribución significativa de las gap junctions en el origen y/o extensión de la OCI. Por otro lado, se demuestra que la OCI es independiente del [Ca2+] extracelular, siendo originada por liberación de calcio desde el RE. Realizamos las primeras medidas directas de la [Ca2+]RE durante la OCI. Destaca un vaciamiento del RE más dilatado en el tiempo que el pico citosólico abriendo la posibilidad a nuevos efectos de la OCI en la fisiología celular y la fisiopatología oftalmológica. YR 2017 FD 2017 LK http://uvadoc.uva.es/handle/10324/24268 UL http://uvadoc.uva.es/handle/10324/24268 LA spa DS UVaDOC RD 27-abr-2024