RT info:eu-repo/semantics/masterThesis
T1 Generación de líneas celulares humanas KNOCKOUT mediante el uso del sistema CRISPR/Cas9
A1 Lebrero Fernández, Patricia
A2 Universidad de Valladolid. Instituto de Biología y Genética Molecular (IBGM)
K1 Citogenética
AB La terapia génica consiste en la introducción de material genético en la célula con el fin de sustituir oreparar un gen defectuoso. Existen tres formas de emplear dicha terapia: sustitución génica (queconsiste en la sustitución del gen defectuoso por el gen normal mediante recombinación homóloga),inserción génica (es decir, introducción de una copia del gen funcional para compensar el defectivo, sinmodificar dicho gen endógeno), o modificación génica (donde el gen defectuoso es reparado mediantemutagénesis dirigida).Esta terapia puede llevarse a cabo in vivo o ex vivo. Las terapias in vivo se basan en la administracióndirecta del gen terapéutico al paciente. Frente a ellas, las terapias ex vivo cobran importancia al permitirel tratamiento de las células aisladas en cultivo, lo que ofrece la posibilidad de la manipulación in vitrocon el transgén.El vehículo encargado de introducir el material genético deseado en el interior de la célula diana sedenomina vector, el cual puede ser transferido mediante un método de transducción (vectores virales) ode transfección (mediante métodos químicos o físicos). Entre los métodos de transferencia génicabasados en vectores no virales se encuentran los métodos químicos, como la lipofección y el empleo defosfato cálcico o de DEAE-dextran; y los métodos físicos como la electroporación, la micro-inyección y lamicro-balística. Por otro lado, los vectores virales, que provienen de virus modificados (recombinantes)como Retrovirus, Lentivirus, Adenovirus, Virus Adeno-asociados o Herpes Simplex Virus entre otros, sonmuy eficientes en la transferencia de material genético en las células hospedadoras y pueden dirigirse alas mismas de forma específica. Sin embargo, a excepción de los Adenovirus, Herpes Simplex Virus yVirus Adeno-asociados (cuya localización es extracromosómica), el resto presentan la desventaja deinsertarse en el genoma del huésped al azar e incluso ser capaces de insertar varias copias. Estosinconvenientes pueden ser causa de mutagénesis y conducir a la muerte celular. Además, la estabilidadde la expresión del transgén es impredecible
YR 2014
FD 2014
LK http://uvadoc.uva.es/handle/10324/6158
UL http://uvadoc.uva.es/handle/10324/6158
LA spa
NO Instituto de Biologí­a y Genética Molecular (IBGM)
DS UVaDOC
RD 26-abr-2024