Análisis de subpoblaciones linfocitarias periféricas y linfocitos intraepiteliales en la conjuntiva tarsal

Abstract

El sistema inmune en general y las subpoblaciones linfocitarias en particular tienen variaciones intra- (ciclos circadianos) e inter- individuales y este hecho puede estar influenciado por factores tales como: la genética, el entorno ambiental, la alimentación, la actividad física, el consumo de diferentes sustancias y/o fármacos, el historial de infecciones del individuo, el sexo y la edad entre otros. El reparto de estas subpoblaciones en el cuerpo humano no es homogéneo, es decir, varía según su localización en las distintas regiones anatómicas. Así por ejemplo, la proporción de linfocitos T CD8+ en sangre puede ser muy diferente a la que se aprecia en los linfocitos intraepiteliales de las mucosas (tanto intestinal, como respiratoria o conjuntiva) dentro del individuo ya sea éste sano o padezca alguna enfermedad de carácter inmunitario. Estas diferencias en la distribución anatómica de los linfocitos resultan interesantes, sobre todo a la hora de diagnosticar a un paciente con sospecha de alguna enfermedad ya que podemos analizar las poblaciones linfocitarias, cuantificarlas y caracterizarlas tomando una muestra de un tejido sólido accesible o de sangre. Por lo tanto, en un futuro muy próximo con un simple análisis de sangre o la toma de una muestra de tejido conjuntival podríamos diagnosticar una patología o alergia ocular de manera rápida y efectiva. En este trabajo queremos empezar caracterizando las poblaciones y subpoblaciones linfocitarias en individuos sanos para el estudio de las poblaciones y subpoblaciones linfocitarias. Existen varios estudios previos en los que se analizan y calculan los porcentajes para cada fenotipo. Pero nosotros, sin embargo, daremos un paso más, no solo analizaremos un gran número de subtipos linfocitarios de las tres estirpes (T,B y NK), sino que además compararemos los valores obtenidos en la sangre con los obtenidos en tejido conjuntival en individuos sanos y, posteriormente, analizaremos los cambios que se observan en diversas patologías oculares asociadas a alergias.Nuestra hipótesis de partida es que las subpoblaciones de linfocitos T, B y NK tanto en la conjuntiva tarsal superior como en sangre periférica cambian en pacientes con alergia ocular con respecto a individuos sanos. Deberíamos ser capaces de detectar variaciones fenotípicas entre estos dos grupos. Además proponemos que no hay correlación directa entre las subpoblaciones linfocitarias sistémicas (sangre) con las regionales (conjuntiva). Para realizar el contraste de hipótesis caracterizaremos las subpoblaciones linfocitarias en sangre y conjuntiva de individuos sanos, así como de pacientes con patología alérgica con clínica ocular. Posteriormente realizaremos la comparación de los resultados entre los diferentes tejidos y grupos de poblaciones.Para ello vamos a 1. Caracterizar las distintas poblaciones linfocitarias T, B y NK en sangre y en conjuntiva y diferenciar fenotípicamente los distintos subtipos y sus proporciones. 2. Comparar y correlacionar (para cada individuo) el fenotipo linfocitario sistémico (sangre) y regional (conjuntiva tarsal). 3. Analizar la influencia de factores intrínsecos o extrínsecos (edad, sexo o patología alérgica) en las subpoblaciones linfocitarias sistémicas y regionales. 4. Evaluar cómo las proporciones de las subpoblaciones estudiadas podrían utilizarse como posibles biomarcadores diagnóstico de enfermedades alérgicas.