Modificación de vectores plasmídicos y su aplicación en polímeros ELR para aplicaciones biomédicas

Abstract

La bacteria Escherichia coli es el huésped procarionte que más se ha empleado para la expresión de proteínas recombinantes. La expresión de dichas proteínas mediante este sistema requiere el uso de vectores específicos, conocidos como plásmidos. Estos vectores son pequeñas moléculas de DNA circular que se encuentran de forma independiente al DNA cromosómico de las bacterias, y no son esenciales para su supervivencia. Gracias al potencial de la mutagénesis sitio-dirigida se pueden modificar regiones específicas de estos vectores, desde eliminar o introducir una secuencia, hasta sustituir un simple nucleótido por otro. En el presente trabajo, mediante mutagénesis sitio-dirigida por PCR, se ha llevado a cabo el desarrollo de: -Un nuevo plásmido de clonación con sitios de corte BamHI, denominado “pDBam”, basado en un plásmido previo. -La construcción génica “pLV-LOX”, que permitirá producir el entrecruzamiento de recombinámeros de tipo elastina (ELR) in situ. -El sistema “pET7-TGFβ”, que conectará covalentemente un péptido que simula TGFβ-1 con diversos recombinámeros.