Análisis de la interacción específica de moléculas frente a un marcador tumoral mediante microbalanza de cuarzo QCM-D (Quartz Cristal Microbalance with Dissipation monitoring)

Abstract

El estudio se enmarca en el desarrollo de nuevos sistemas de dosificación controlada de fármacos mediante el uso de recombinámeros tipo elastina (ELRs), los cuales, son una familia de biopolímeros proteicos producidos mediante técnicas de ADN recombinante, inspirados en la elastina natural y cuyas propiedades (biocompatibilidad, capacidad de autoensamblado, comportamiento inteligente) han permitido su aplicación en distintos campos biomédicos, entre ellos, liberación dirigida y controlada de fármacos o agentes génicos, que es en el que se centra el proyecto. Los ELRs pueden formar micro- o nanopartículas mediante autoensamblado y, de esta forma, encapsular fármacos o formar poliplexos (complejos polímero-ADN) con ácidos nucleicos. Su direccionamiento se puede llevar a cabo mediante fusión recombinante de los ELRs a fragmentos de anticuerpo (conservan el sitio de unión al antígeno), como scFv, o mediante conjugación química con aptámeros (ssRNA o ssDNA seleccionados por su unión específica a una diana). En el presente trabajo, se evaluará esta última haciendo uso de una microbalanza de cristal de cuarzo con monitoreo de disipación QCM-D (Quartz Crystal Microbalance with Dissipation Monitoring), técnica a nanoescala en tiempo real para analizar fenómenos de superficie que incluyen formación de película delgada, mediante interacciones y/o reacciones. Tras estudios recientes, ha podido considerarse una estrecha relación entre la Tenascina-C y la posibilidad de desarrollo de un cáncer de mama. Los niveles de Tenascina-C son elevados en recién nacidos pero, al crecer, dichos niveles comienzan a disminuir; sin embargo, en pacientes que han desarrollado un cáncer de mama, se ha observado una sobreexpresión de dicha proteína, por lo que se puede decir que la Tenascina-C parece constituir una buena diana terapéutica para el tratamiento del cáncer de mama metastásico. Este trabajo se enmarca en el estudio de la interacción específica entre los aptámeros TTA1 y GBI10 y la Tenascina-C, con objeto de evaluar la posibilidad de utilizarlos como moléculas dirigidas frente a la Tenascina-C, y así direccionarlos en la terapia génica. Este trabajo también comprende la puesta a punto y optimización de las condiciones de trabajo y limpieza del sensor utilizado en el método de análisis.