Estudio del mecanismo de acción de la proteína neuroprotectora ApoD en modelos experimentales de enfermedades neurodegenerativas.

Abstract

Las enfermedades neurodegenerativas son un problema de gran impacto social y económico, de difícil diagnóstico y tratamiento. Por ello es crucial la búsqueda y estudio de sus mecanismos moleculares. La relación entre el estrés oxidativo y las células del SNC está bien establecida como motivo de degeneración, por lo que este proyecto se ha enfocado en el estudio de la proteína ApoD, que tiene un significativo poder antioxidante, especialmente en las membranas celulares. Se ha propuesto el uso de una sonda fluorescente que reaccione frente a la peroxidación lipídica de las membranas como consecuencia del estrés oxidativo (BODIPY-C11) para comprobar la actividad de ApoD en la línea celular HeLa. Para tomar las medidas se ha utilizado un equipo que combina técnicas de microscopía automatizada y detección convencional en microplaca: el Cytation5. El estrés oxidativo se evaluó mediante dos métodos: inmunocitoquímica con anticuerpo anti-4-HNE y medida de fluorescencia con BODIPY-C11. Los resultados probaron que, por lo general, BODIPY-C11 es una técnica más eficaz que la inmunocitoquímica. Se comprueba la gran utilidad de BODIPY-C11 para medir el estado de las membranas celulares bajo estrés oxidativo. Sin embargo, con los experimentos realizados, no se obtiene la suficiente evidencia como para realizar afirmaciones sobre la utilidad de BODIPY-C11 para la determinar la acción de ApoD, aunque los resultados preliminares obtenidos son prometedores para el futuro desarrollo de esta línea de investigación.