Molecular Investigation of Tularemia Outbreaks, Spain, 1997–2008

Abstract

La tularemia es una zoonosis causada por la bacteria Gram negativa Francisella tularensis. F.tularensis es un patógeno intracelular facultativo altamente contagioso y tiene dosis infecciosastan bajas como 10–50 bacterias; se transmite por inhalación, contacto directo con animalesinfectados o ingestión de agua o alimentos contaminados. El número de especies susceptibles a lainfección por este agente es mayor que para cualquier otro patógeno zoonótico conocido. Se hadesctio la presencia de tularemia por primera vez en España en 1997, cuando causó uno de losbrotes más grandes en humanos jamás descritos. En total, se confirmaron 559 casos entre junio de1997 y abril de 1998 en 10 provincias. El brote se asoció con la caza y manejo de liebres (Lepus eu-ropaeus) en el noroeste de España. La forma clínica más frecuente fue la tularemia ulceroglandular (55,4%); Las formas glandulares (15,3%) y tifoideas (6,6%) de la enfermedad también ocurrieron con frecuencia. Un segundo brote humano importante en humanos, que afectó a 507 personas, ocurrió en la misma área en 2007 y 2008, pero en un contexto epidemiológico diferente. Su momento coincidió con un pico poblacional del topillo campesino común (Microtus arvalis), y las formas clínicas más frecuentes de la enfermedad fueron tifoidea yneumónica (65% de los casos), lo que es consistente con la infección que se adquiere porinhalación de F . tularensis. En este trabajo describimos los análisis genéticos comparativos de F. tularensis obtenidos dehumanos y animales durante los 2 brotes de tularemia principales (1997–1998 y 2007–2008).También estudiamos los aislamientos de F. tularensis que circulan en España durante brotes con diferentes patrones epidemiológicos e investigamos si la reemergencia del patógeno después de10 años sin actividad epidemiológica fue causada por la introducción de cepas exóticas o por elestablecimiento del patógeno en depósitos locales de infección. Para ello, evaluamos los aislamientos involucrados en estos brotes mediante el uso de electroforesis en gel de campopulsado (PFGE) con 2 enzimas de restricción y el análisis de repetición en tándem de númerovariable multilocus (VNTR) de 16 loci genómicos de Francisella tularensis. Los aislamientos se dividieron en 3 pulsotipos mediante electroforesis en gel de campo pulsado y 8 perfiles alélicos mediante análisis de repetición en tándem de número variable de enfoque múltiple. Los aislamientos obtenidos del segundo brote de tularemia tenían los mismos genotipos que los aislamientos obtenidos del primer brote. Ambos brotes fueron causados por genotipos dels ubclade genético B.Br:FTNF002–00, que se distribuye ampliamente en países de Europa central y occidental. Así, el resurgimiento de la tularemia en España no fue causado por la reintroducciónde cepas exóticas, sino probablemente por la persistencia de reservorios locales de infección.