RT info:eu-repo/semantics/masterThesis
T1 Estudio de la señal del calcio en tumores cerebrales humanos
A1 Hernando Pérez, María Elena
A2 Universidad de Valladolid. Instituto de Biología y Genética Molecular (IBGM)
K1 Tumor cerebral
K1 Ca2+ intracelular
AB El cáncer ha sido recientemente relacionado con la dishomeostasis o remodelado del Ca2+intracelular. El fenotipo tumoral se caracteriza por el aumento descontrolado de la proliferacióny de la migración celulares, y la resistencia a la muerte celular, procesos en los cuales participadirectamente el Ca2+ intracelular. Sin embargo, muchos de los estudios se han llevado a cabo en líneas celulares, no habiendo prácticamente datos en tumores primarios y/o metástasiscerebrales. En el presente estudio se ha desarrollado un protocolo original para el cultivoprimarios de muestras frescas de tumores cerebrales extraídos en la unidad de neurocirugía del Hospital Universitario del Río Hortega (HURH) para el análisis de la señal de Ca2+en tumores cerebrales. Se han recibido 22 muestras que fueron congeladas inmediatamente. En 14 de las muestras recibidas incluyendo 4 meningiomas, 2 oligodendrogliomas, 2 astrocitomas, 2 glioblastomas y 4 metástasis (dos pulmonares, 1 adenopapilar y otra ductal de mama) se hapodido establecer cultivos primarios de células tumorales. Las células se sembraron sobrecubreobjetos estériles para monitorizar el Ca2+intracelular a nivel de célula única medianteimagen de fluorescencia y el estudio de la expresión de marcadores por inmunofluorescencia.Los experimentos de imagen se llevaron a cabo el mismo día de la obtención de la muestra (0días in vitro, 0 DIV), el día siguiente (1 DIV) o tras su cultivo a largo plazo. Se ha estudiado lamagnitud de la entrada capacitativa de Ca2+y las respuestas a diferentes estímulos incluyendo la despolarización con alto potasio (K+) que activa canales de Ca2+dependientes de voltaje,glutamato y ATP. En algunos casos se estudiaron también los efectos de agonistas específicoscomo NMDA, kainato o el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF). Los resultadosmuestran que los células de tumores de origen glial (oligodendrogliomas, astrocitomas yglioblastomas) expresan GFAP mientras que las células de metástasis cerebrales no lo expresan.Respecto a las respuestas funcionales, encontramos que los oligodendrogliomas responden adespolarización con alto K+, kainato y PDGF. Los glioblastomas responden a NMDA, pero no aK+, ATP o glutamato. En contraste, los meningiomas y astrocitomas responden a ATP, pero noa K+ o glutamato. Finalmente, los datos sugieren una correlación negativa entre la malignidaddel tumor y la entrada capacitativa de Ca2+. Las metástasis pulmonares y adeno papilar muestran déficit de SOCE y responden, casi exclusivamente, a ATP. Estos resultados siembran las bases para una caracterización del remodelado del Ca2+ intracelular en tumores cerebrales y podrían contribuir al mejor diagnóstico, pronóstico y tratamiento de estos tumores.
YR 2018
FD 2018
LK http://uvadoc.uva.es/handle/10324/31919
UL http://uvadoc.uva.es/handle/10324/31919
LA spa
DS UVaDOC
RD 18-nov-2024