RT info:eu-repo/semantics/bachelorThesis T1 Desarrollo de un método analítico a partir de biopolímeros. A1 Merino Garrote, Cristina A2 Universidad de Valladolid. Escuela de Ingenierías Industriales K1 Enzimas - Aplicaciones industriales AB El presente trabajo fin de grado tiene por objeto el estudio de la actividad enzimática de serin proteasas a través del desarrollo de una técnica como esla zimografía. Esta técnica se desarrolla a través de geles de poliacrilamida quecontienen como sustrato un material polimérico, es este caso recombinámerostipo elastina (ELRs), un tipo de biomateriales biocompatibles, bioactivos ysensibles a múltiples estímulos (temperatura, pH...), cuya estructura se diseña“a la carta” mediante ingeniería genética.Una vez bioproducidos gracias al crecimiento controlado de las bacteriasEscherichia Coli genéticamente alteras, los ELRs se modifican químicamentepara incorporar a su secuencia grupos metacrilato.Se realizaron ensayos de zimografía para controlar la actividad enzimáticade las serin proteasas en los diferentes ELRs empleados como sustrato en elgel de poliacrilamida. Estos ensayos cosntan de cuatro partes:- Formación del gel con el polímero como sustrato y las serin proteasascomo muestras.- Electroforesis.- Incubación durante 16h a 37 °C- Proceso de teñido y desteñido del gel.Se utilizaron diferentes concentraciones de serin proteasa, además dedistintas serin proteasas, como tripsina o elastasa. Finalmente, se tomaronimágenes a diferentes tiempos de desteñido del gel, para después cuantificarla intensidad de la actividad enzimática obtenida en cada uno de los ELRs.El objetivo último de este TFG es desarrollar un método para lacuantificación de serin proteasas. Anomalías en la actividad de éstas sonindicio de algunas enfermedades como el cáncer. Así que en un futuro podráaplicarse a muestras de fluidos biológicos con el fin de detectar estasanomalías. YR 2018 FD 2018 LK http://uvadoc.uva.es/handle/10324/32287 UL http://uvadoc.uva.es/handle/10324/32287 LA spa NO Departamento de Química Analítica DS UVaDOC RD 24-nov-2024