RT info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
T1 Papel de la isoforma mitocondrial de FASTK en la modulación de la fagocitosis no opsónica de bacterias por los macrófagos
A1 García del Río, Ana
A2 Universidad de Valladolid. Facultad de Medicina
K1 Fagocitosis
K1 Bacterias
K1 Proteínas
K1 Mitocondrias
K1 Macrófagos
AB La mitocondria es un orgánulo esencial para la función celular, incluyendo lageneración celular de la energía en forma de ATP a través de la fosforilación oxidativa(OXPHOS) y la oxidación de metabolitos. La proteína de unión a RNA, FASTK (Fasactivated serine/threonine kinase), tiene dos isoformas, una localizada en la mitocondria(mitoFASTK), y la otra isoforma en citosol y núcleo (cytoFASTK). Se ha demostrado quela isoforma mitoFASTK es necesaria para la biogénesis del mRNA ND6 mitocondrial,que codifica una subunidad esencial del complejo I de la cadena respiratoriamitocondrial (CI, NADH:ubiquinona oxidorreductasa). Este estudio investiga losmecanismos de acción de FASTK en la fagocitosis no opsónica.En nuestro laboratorio se ha observado que los macrófagos de los ratonesFASTK KO muestran un aumento en la fagocitosis no opsónica de bacterias y unadisminución del ~50 % de la actividad del CI en estas células. Durante el trabajorealizado en esta Tesis Doctoral, como método de estudio para explorar si ladisminución de la actividad del CI explica el fenotipo fagocítico, se empleó el tratamientocon el inhibidor del CI, rotenona, en los macrófagos murinos WT, así como en la líneacelular murina RAW 264.7. En paralelo se silenciaron con shRNAs en dicha línea celular,las dos subunidades del CI (NDUFS3 y NDUFS4). Se observó que, tanto el tratamientofarmacológico con rotenona como el silenciamiento de las subunidades NDUFS3 yNDUFS4, resultaba en un aumento en la fagocitosis bacteriana no opsónica. Lareexpresión de mitoFASTK en los macrófagos silenciados en FASTK rescata el fenotipo(es decir, la fagocitosis vuelve a ser normal). Asimismo, la disminución de la actividaddel CI en los macrófagos FASTK KO está asociada con un aumento en la fosforilaciónde AMPK, y su inhibición utilizando el compuesto C revierte el fenotipo fagocítico.Finalmente, se ha demostrado que los macrófagos FASTK KO muestran aumento en laproducción de mitoROS respecto a los macrófagos WT durante la fagocitosis noopsónica de bacterias.En conclusión, estos resultados, demuestran por primera vez que mitoFASTKtiene un papel regulador negativo en la fagocitosis no opsónica de bacterias por losmacrófagos, a través de la función del CI y la activación de AMPK.Es de interés ahondar en el conocimiento sobre los mecanismos que explican elfenotipo observado y trasladarlo a modelos in vivo. Estos estudios pueden contribuir ala generación de tratamientos que aumenten la captación y la eliminación de bacteriasantes de que causen reacciones inflamatorias exageradas; también pueden ayudar acombatir la invasión bacteriana en lugares anatómicos con cantidad limitada deopsoninas.
YR 2019
FD 2019
LK http://uvadoc.uva.es/handle/10324/36270
UL http://uvadoc.uva.es/handle/10324/36270
LA spa
NO Departamento de  Anatomía Patológica, Microbiología, Medicina Preventiva y Salud Pública, Medicina Legal y Forense
DS UVaDOC
RD 24-nov-2024