RT info:eu-repo/semantics/masterThesis T1 Evaluación de la expresión de genes implicados en la muerte celular y en la autofagia en un modelo de neurodegeneración retiniana A1 Galindo Cabello, Nadia Regina A2 Universidad de Valladolid. Instituto de Biología y Genética Molecular (IBGM) K1 Retina - Enfermedades K1 Retina K1 Neurodegeneración K1 Apoptosis K1 Necroptosis K1 Autofagia K1 3201.09 Oftalmología AB La degeneración de la retina es un proceso común entre diversas enfermedades neurodegenerativas como la retinitis pigmentosa o la degeneración macular asociada a la edad. Actualmente, estas patologías son la principal causa de ceguera a nivel mundial y carecen de tratamientos efectivos. Durante el proceso de neurodegeneración los mecanismos de muerte celular, necroptosis y la autofagia están implicados, y su alteración está asociada a estados patológicos de la retina. En este sentido, el uso de modelos de estudio de neurodegeneración retiniana son necesarios para caracterizar y entender a cómo se dan estos procesos. El objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión de los genes implicados en la muerte celular y autofagia en un modelo de neurodegeneración retiniana. Se obtuvieron explantes de neuroretina porcina y la degeneración retiniana se evaluó a los días 0, 1, 3, 6 y 9 de cultivo. Las características morfológicas y de inmunorreactividad de la proteína GFAP fue mediante inmunohistoquímica. La cuantificación de la expresión relativa del mRNA de los genes implicados en la apoptosis, necroptosis y autofagia fue mediante qPCR. El análisis estadístico se realizó con el software SPSS v15. Los resultados mostraron un aumento de la inmunoreactividad de la proteína GFAP indicando la activación e incremento de la gliosis a lo largo del tiempo. Los genes implicados en la apoptosis BAX, CASP3, CASP8 y CASP9 incrementaron su expresión durante los días 3, 6 y 9, relacionándose a la apoptosis vía caspasa dependiente; por el contrario, el gen BCL2 tuvo un descenso de la expresión desde el día 3. Los genes implicados en la necroptosis MLKL, RIPK1 y RIPK3 mostraron la formación del necrosoma durante los días 3 y 6. Los genes implicados en la autofagia indicaron su activación inhibiendo a mTOR y aumentando la expresión de BCLIN1 y ATG7 durante los días 1 y 3; además la expresión de LC3B reflejó la formación de autofagosomas desde el día 3; finalmente, SQSTM1 tuvo expresión baja hasta el día 9. En conclusión, el modelo de neurodegeneración retiniana de explantes ex vivo mostró el incremento de la gliosis y activación de los mecanismos de apoptosis, necroptosis y autofagia. YR 2021 FD 2021 LK https://uvadoc.uva.es/handle/10324/48636 UL https://uvadoc.uva.es/handle/10324/48636 LA spa NO Departamento de Bioquímica y Biología Molecular y Fisiología DS UVaDOC RD 20-oct-2024