RT info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
T1 Generación de modelos celulares de enfermedad mitocondrial mediante la herramienta CRISPR/Cas9
A1 Martín Gutiérrez, Roberto
A2 Universidad de Valladolid. Facultad de Medicina
K1 Mitocondrias - Enfermedades
K1 CRISPR/Cas9
K1 Edición genética
K1 Mutación 1660C>T
K1 Gen SDHA
AB En este trabajo de fin de grado, se desarrolló un modelo celular para el estudio deenfermedades mitocondriales utilizando la herramienta de edición genéticaCRISPR/Cas9. El objetivo principal fue introducir la mutación 1660C>T asociada con elsíndrome de Leigh (un trastorno neurodegenera tivo severo en el gen SDHA queforma parte del Complejo II mitocondrial . Para ello, se seleccionaron guías de RNA(gRNA) específicas, sintetizadas y purificadas mediante técnicas estándar. Lascondiciones de electroporación fueron optimizadas en células U2OS utilizando elsistema de electroporación Neon, para luego aplicarlas en la línea celular 143 B. Seutilizó un oligo donante específico para introducir la mutación deseada. Tras laelectroporación, se sembraron las células mediante dilución límite y se preparó DNAgenómico para su análisis por PCR con objeto de identificar las células donde haocurrido edición génica. Falta por analizar mediante secuenciación “Sanger" si laedición ha ocurrido sin errores y si está en heterocigosis u homocigosis . Este modelocelular proporcionará una plataforma valiosa para estudiar los cambios metabólicos yfuncionales causados por dicha mutación y abre la posibilidad de ensayar estrategiasque recuperen las funciones celulares alteradas presentes en este síndrome . Lacreación de modelos celulares específicos para enfermedades genéticas permite unamejor comprensión de los procesos patológicos y ofrece oportunidades paradesarrollar y ensayar terapias innovadoras.
YR 2024
FD 2024
LK https://uvadoc.uva.es/handle/10324/72176
UL https://uvadoc.uva.es/handle/10324/72176
LA spa
DS UVaDOC
RD 22-dic-2024