RT info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
T1 Determinación de oxilipinas mediante UHPLC-MS/MS
A1 Asensio Pérez, Cristina
A2 Universidad de Valladolid. Facultad de Ciencias
K1 Oxilipinas
K1 UHPLC-MS/MS
K1 SPE
AB Las oxilipinas son una clase de lípidos bioactivos derivados de ácidos grasos poliinsaturados,conocidos por su papel en la regulación de la inflamación y otras funciones fisiológicascruciales como la regulación de la presión arterial. Debido a su diversidad estructural y bajaabundancia en muestras biológicas, su análisis representa un desafío significativo.Tradicionalmente, los métodos de análisis de estas moléculas han incluido inmunoensayos,cromatografía en capa fina (TLC), cromatografía de líquidos con detectores de matriz de diodoso fluorescencia, y electroforesis capilar con detectores de matriz de fotodiodos. Sin embargo,estos métodos han demostrado tener sensibilidades bajas y limitaciones en la precisión yespecificidad. Para superar estas limitaciones, se ha desarrollado un método analítico basado encromatografía líquida de ultra-alto rendimiento acoplada a la espectrometría de masas entándem (UHPLC-MS/MS) con monitoreo de múltiples reacciones (MRM). Este enfoqueavanzado permite la caracterización y cuantificación precisa de oxilipinas en muestrasbiológicas. En este contexto, se realizaron estudios específicos para la cuantificación deoxilipinas nativas y estándares internos deuterados. Se construyó una línea de calibrado condiferentes niveles de concentración para evaluar la sensibilidad, el rango lineal, el límite dedetección (LOD) y el límite de cuantificación (LOQ). Además, se llevó a cabo la extracción enfase sólida (SPE) de sobrenadantes de células RAW 264.7 tratadas con LPS, así como demedios de cultivo dopados, para determinar el efecto matriz, la recuperación y la eficiencia delmétodo. Este método UHPLC-MS/MS con el modo de trabajo MRM ha demostrado seraltamente sensible y preciso, con la capacidad de analizar perfiles complejos de oxilipinas enmuestras biológicas, lo que abre nuevas oportunidades en el campo de la lipidómica biomédicay la investigación de procesos inflamatorios.
YR 2024
FD 2024
LK https://uvadoc.uva.es/handle/10324/74115
UL https://uvadoc.uva.es/handle/10324/74115
LA spa
NO Departamento de Bioquímica y Biología Molecular y Fisiología
DS UVaDOC
RD 31-ene-2025