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    Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem:http://uvadoc.uva.es/handle/10324/12377

    Título
    Métodos de modificación génica dirigida en células humanas y su aplicación en el Síndrome de Wiskott-Aldrich
    Autor
    Bernardi, María Alejandra
    Director o Tutor
    Fuente García, Miguel Ángel de laAutoridad UVA
    Simarro Grande, MaríaAutoridad UVA
    Editor
    Universidad de Valladolid. Facultad de MedicinaAutoridad UVA
    Año del Documento
    2015
    Abstract
    Generamos una línea celular reportera (RCL) en la que introdujimos una copia del gen EGFP truncado en 3´. También generamos un virus adenoasociado recombinante (rAAV), que contenía el gen EGFP truncado en 5´. Utilizando la RCL y el rAAV, junto con nucleasas TALEs, estudiamos una proteína de fusión y una librería de siRNAs para incrementar la frecuencia de recombinación homóloga (RH). Habiendo determinado las condiciones que generaron un mayor aumento en la frecuencia de RH, aplicamos estas para la generación de una línea celular KO para el gen WAS (Wiskott-Aldrich Syndrome) en fibroblastos. Para ello generamos un rAAV con una mutación en WAS. Posteriormente, se corrigió la mutación en dichas células, utilizando un rAAV con una copia wt del gen. Construimos también una línea WAS-KO en la línea celular Jurkat utilizando las nickasas CRISPR/Cas9. Los fibroblastos corregidos, que contienen una copia normal de WAS se transdiferenciaron a células CD45+.
    Materias (normalizadas)
    Genética médica
    Nucleasas
    Wiskott-Aldrich, Síndrome de
    Biología molecular
    Departamento
    Departamento de Bioquímica y Biología Molecular y Fisiología
    DOI
    10.35376/10324/12377
    Idioma
    spa
    URI
    http://uvadoc.uva.es/handle/10324/12377
    Derechos
    openAccess
    Collections
    • Tesis doctorales UVa [2414]
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    Nombre:
    Tesis684-150715.pdf
    Tamaño:
    18.51Mb
    Formato:
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