Valoración cuantitativa del crecimiento del cultivo de células de Schwann de rata

Abstract

Estudios recientes han demostrado que las células de Schwann (SCs) son necesarias en la regeneración en el sistema nervioso periférico (SNP) y podrían también dar soporte a la regeneración en el sistema nervioso central (SNC). Por esto, el trasplante autólogo de SCs es uno de los tratamientos propuestos para la reparación de lesiones nerviosas y en nervios y médula espinal, siendo, por tanto, necesario desarrollar un método seguro y eficaz para la obtención de SCs en una cantidad suficiente, con una alta pureza y en un periodo de tiempo relativamente corto permitiendo así su aplicación clínica. En este trabajo se estudia el cultivo de SCs procedentes de nervio ciático de ratas adultas llevando a cabo una predegeración in vitro previa de los nervios durante un periodo de 7 días tras el cual se disociaron y cultivaron utilizando como medio de cultivo Dulbecco modificado (Dulbecco’s Modified Eagle Medium, DMEM) con 10% de suero bovino fetal (FBS) y 1% de antibióticoantimicótico y neurregulina (NRG1-β1) 10 nM (8 μL/ml), que favorece la proliferación de las células de Schwann frente a los fibroblastos, siendo la contaminación por estas células uno de los principales problemas para la obtención de SCs. Mediante la caracterización morfológica de las células y el estudio inmunohistoquímico se pudo confirmar que se obtenían SCs y que la máxima cantidad de células se obtenía tras un periodo en cultivo de entre 14 y 21 días, corroborándose así los resultados obtenidos por otros autores. Así mismo, también se pudo confirmar que el mitógeno utilizado, la NRG1-β1 favorece el crecimiento de las SCs. Por tanto, se tiene un método sencillo que permite obtener altas cantidades de SCs en un tiempo adecuado utilizando un medio sin elementos que puedan dar lugar a posibles efectos adversos en un contexto clínico.