Desarrollo de un modelo de cultivo organotípico de neurorretina porcina suplementado con células de epitelio pigmentado de la retina

Abstract

Se pretende desarrollar un modelo de cultivo organotípico de retina neural porcina suplementado con células del epitelio pigmentario de la retina (EPR) que simule las modificaciones celulares y estructurales asociadas al desprendimiento de retina. Material y método: A partir de 11 ojos de cerdo, se aislaron células del EPR y se prepararon explantes de neurorretina, procedentes de la región del area centralis, de modo que se obtuvieron explantes control y experimento de cada ojo. Se realizaron 6 cultivos control (cultivo organotípico de neurorretina de cerdo) y 6 experimento (cultivo organotípico de neurorretina de cerdo suplementado con EPR) durante 9 días. A la finalización del cultivo, los explantes fueron procesados y evaluados histológicamente, tinción con Azul de Toluidina, y mediante técnicas de inmunohistoquímica, anticuerpos frente a GFAP (glial fibrillary acidic protein), CRALBP (cellular retinaldehide binding protein), calbindina y sinaptofisina. Resultados: las muestras procedentes de los cultivos experimento presentaron un menor grado de degeneración, menores alteraciones estructurales y mayor espesor respecto a los controles. Además, se observó una expresión contenida de GFAP, mientras que la expresión de calbindina y de sinaptofisina fue superior en los experimentos respecto a los controles. Conclusiones: se ha puesto a punto un modelo de cultivo organotípico de neurorretina de cerdo con células del EPR que simula las modificaciones celulares asociadas con los procesos de degeneración retiniana de una manera más cercana al desarrollo in vivo, con respecto a los modelos in vitro previos. La presencia de las células del EPR influye positivamente en la ralentización de los procesos de degeneración retiniana durante el cultivo.