Expresión de factores de crecimiento en tejidos oculares de conejo con insuficiencia límbica y análisis de sus receptores en células madre mesenquimales

Abstract

El objetivo de este trabajo es analizar la expresión de factores de crecimiento en tejidos oculares dañados y su variación tras el tratamiento con células madre mesenquimales de tejido adiposo (AT-MSCs), y estudiar la expresión de sus correspondientes receptores de membrana en AT-MSCs expuestas in vitro a un microambiente inflamatorio. Mediante inmunodetección, se estudió la expresión de VEGF-A, EGF y PDGF-B en un modelo en conejo de deficiencia de células madre limbo-corneales (LSCD) tratado con AT-MSCs, a corto y largo plazo postratamiento. Por citometría de flujo se analizó la expresión de EGF-R, PDGFR-B, VEGFR y NRP-1 en la superficie de AT-MSCs expuestas in vitro al secretoma de células epiteliales corneales inflamadas, en presencia y ausencia de suero en el medio de cultivo. La expresión de EGF y PDGF-B aumentó hasta niveles similares a los de tejidos sanos, tanto a tiempo corto como largo postratamiento. En cambio, los niveles de VEGF-A aumentaron respecto a los controles en los tejidos dañados, excepto en aquellos tratados con AT-MSCs y evolución a largo plazo. En la superficie de las AT-MSCs expuestas a condiciones inflamatorias se observó un aumento en la expresión de EGF-R y NRP-1, junto con una disminución de PDGFR-B y VEGFR. El tratamiento con AT-MSCs moduló la expresión de factores de crecimiento en tejidos con LSCD, especialmente a tiempos largos postratamiento, aumentando EGF y PDGF-B y reduciendo VEGF-A. Además, la exposición de AT-MSCs a un microambiente inflamatorio alteró la expresión de sus respectivos receptores de membrana, evidenciando su capacidad de respuesta a estímulos locales.