RT info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
T1 Edición génica mediante un método CRISPR/CAS 9 autocatalítico en células humanas
A1 Cáceres Castro, José Miguel
A2 Universidad de Valladolid. Facultad de Medicina
K1 Modificación genética
K1 MCR (Mutagenic Chain Reaction)
AB En este Trabajo de Fin de Grado se describe la producción de un sistemade modificación genética basado en una variante de la herramienta de edicióngénica CRISPR/Cas9 denominada MCR (Mutagenic Chain Reaction), la cual esdescrita en el texto, con el objetivo de conseguir mediante únicamente latransfección celular de un plásmido un knockout. Para ello la secuencia delplásmido debe ser capaz de integrarse en el genoma en el sitio dianaproduciendo la mutación causante del knockout y tras esto seguir expresándosecausando la mutación del alelo homólogo. Se diseñan dos estrategias: por unaparte, utilizando Cas9 wild type y por la otra Cas9 nickase, un tipo de Cas9 conuno de sus dominios nucleasa desactivado, con un doble propósito; aumentarlas posibilidades de conseguir un sistema funcional y de comparar, si se diera elcaso, ambos sistemas; esperando mayor especificidad con cas9 nickase.Este sistema se va a aplicar sobre la línea celular THP-1, una línea celularmonocítica humana extraída de un paciente con leucemia monocítica agudateniendo como diana el gen FASTK, primer homólogo descubierto de la familiaFASTK y que está siendo material de estudio en el laboratorio del IBGM (Institutode Biología y Genética molecular) de Valladolid dónde trabajé, produciendocélulas cuyo fenotipo será estudiado pero que no son materia de este trabajo.
YR 2018
FD 2018
LK http://uvadoc.uva.es/handle/10324/30237
UL http://uvadoc.uva.es/handle/10324/30237
LA spa
DS UVaDOC
RD 17-may-2024