Cultivo tridimensional de fibroblastos corneales porcinos

Abstract

En la actualidad se persigue desarrollar tejidos biomiméticos de cara a su utilización en trasplantes o como modelos experimentales. Una de las dificultades que presenta esta disciplina es el cultivo celular en tres dimensiones, donde es necesaria una matriz o gel que mantenga la disposición espacial de las células sin alterar sus propiedades. Un tipo de matriz utilizado es la matriz de fibrina a partir de fibrinógeno, obtenido por medio de procedimientos industriales o directamente de derivados sanguíneos, como el plasma fresco o el crioprecipitado de plasma. El objetivo de este trabajo es comprobar que el cultivo de fibroblastos de estroma corneal porcino en matrices de plasma fresco y de crioprecipitado de plasma no afecta a su morfología ni a la expresión de un marcador específico (vimentina). También se pretende comparar la proliferación celular en ambos tipos de matriz. Para el análisis morfológico y caracterización se realizaron varias tinciones: tinción nuclear de Hoechst, tinción de hematoxilina‐eosina, e inmunotinciones de vimentina, Ki67 y e‐cadherina. Para comparar la proliferación en ambas matrices esta se midió utilizando la prueba del AlamarBlue®, cuyos resultados se compararon utilizando la prueba de t de Student.