Modelos celulares deficientes en la enzima succinato deshidrogenasa para el estudio funcional del complejo CII-low

Abstract

Las mitocondrias son orgánulos esenciales en la producción de energía mediante la fosforilación oxidativa. Dentro de este proceso, el complejo II o succinato deshidrogenasa desempeña un papel clave al actuar como nexo entre el ciclo de los ácidos tricarboxílicos y la cadena de transporte de electrones. Este trabajo tiene como objetivo la generación de modelos celulares knock-out para las subunidades SDHA y SDHB mediante la tecnología CRISPR/Cas9 que permitan la caracterización de la forma alternativa de SDH/CII, denominada CII-low. Las mutaciones de cada clon se determinaron mediante PCR y secuenciación Sanger, y la ausencia de expresión proteica mediante Western Blot. Se observó una pérdida de la actividad enzimática SDH en ambas líneas KO en comparación con células parentales. Los resultados obtenidos proporcionan una base para futuras investigaciones sobre el papel de CII-low en la regulación metabólica y su implicación en el cáncer, abriendo la posibilidad de nuevas estrategias terapéuticas dirigidas.