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Please use this identifier to cite or link to this item: http://uvadoc.uva.es/handle/10324/12059
Title: Generación de un modelo celular de síndrome PAPA utilizando la técnica CRISPR/Cas9.
Authors: García Cortés, Celia
Editors: Universidad de Valladolid. Instituto de Biología y Genética Molecular (IBGM)
Tutor: Fuente García, Miguel Ángel de la
Issue Date: 2015
Degree : Máster en Investigacion Biomédica
Abstract: Con los datos proporcionados previamente, podemos definir como objetivo del trabajo la obtención de un modelo celular del síndrome PAPA, analizando los efectos a pequeña escala de las mutaciones que provocan la enfermedad, usando una línea celular de estirpe monocítica. Para ello se seleccionan las dos mutaciones más recurrentes encontradas en pacientes con el síndrome PAPA (A230T y E250Q), y se introducen en una línea celular humana a través del sistema de endonucleasas CRISPR/Cas9. Para este fin, se plantean los siguientes objetivos: - Construcción de vectores que contengan el gen de la nucleasa Cas9 nickasa y las secuencias guía específicas, con el fin de obtener cortes de cadena simple en lugares específicos del genoma en el gen CD2BP1 en las células diana. - Construcción de dos plásmidos donantes que contengan parte del gen CD2BP1 con sendas mutaciones que causan el síndrome PAPA. - Introducción de los plásmidos CRISPR junto con los plásmidos donantes en células THP-1 mediante nucleofección. - Selección de los clones celulares modificados que incorporan la mutación mediante PCR y dilución límite.
Departament : Instituto de Biología y Genética Molecular (IBGM)
Language: spa
URI: http://uvadoc.uva.es/handle/10324/12059
Rights: info:eu-repo/semantics/openAccess
Appears in Collections:Trabajos Fin de Máster UVa

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